ICS 11.020 C 50

WS

中华人民共和国卫生行业标准WS/T 224—2018

代替 WS/T 224—2002

真空采血管的性能验证

Performance verification of vacuum tubes for venous blood specimen

2018 - 04 - 27 发布 2018 - 11 - 01 实施中华人民共和国国家卫生健康委员会 发 布

前言

WS/T 224—2018

I

1 范围

 本标准规定了真空采血管性能要求及验证方法。 

本标准适用于临床实验室在正式使用新采血管前对其进行性能验证。对正在使用的采血管的检测结 果有疑问、查找原因可能与采血管相关时，也可采用本标准对采血管进行性能验证。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 术语和定义

 下列术语和定义适用于本文件。 

在一个标本采集管中，添加的任何促进一个预定功能(如防止凝血或糖酵解)的试剂。注:尽管容器盖不被认为是一种添加剂，但它可能含有或涂覆添加剂，若它们进入标本中接触，应被认为是添加剂。

 检测结果的预期值与可接受值之间的差异。 

WS/T 224—2018

真空采血管的性能验证

1

WS/T 224—2018注:管盖的作用使采血后容器的口部与外界形成隔离以确保安全，一般管盖内部还有一个能与容器口部形成密封的

密闭容器的组件。塞体以保护血样，本标准称其为管盖而不称其为塞子，目的是突出其安全作用。

3.7

3.8

3.10

采血管附加物 receptacle accessory

生产者放于采血管内部，以有助于采集、混合或分离样品的部件。示例:放入血清或血浆采血管中的小型塑料惰性球(或分离胶)，用于离心后从血液中分离血清或血浆。

研究中实际观测或调查的一部分个体。通过检查、研究和分析样本的特征来反映总体情况。

3.12

验证 verification

通过提供客观证据对规定要求已得满足的认定。注:终端用户(临床实验室)有责任验证制造商生产的器械性能。

4 真空采血管的性能验证4.1 外观

重量测定分析法 gravimetric analysis

通过称重和校正液体的质量密度测定液体体积的方法。注:本文件中，以1000mL水的质量为1000g。

抽吸量 draw volume，DV

从静脉穿刺处负压吸至真空采血管中的血液的体积。注:在标准条件(温度18°C~25°C，标准大气压)下，真空采血管采水到平衡时的总重量。

2

WS/T 224—2018试管应透明，无异物;试管无变形和破损;标识应清晰(真空采血管标签及管盖颜色国际通用标准

参见附录A);管盖无脱落;采血管内的分离胶的胶体应呈凝胶状。

4.2 抽吸量4.2.1 要求

抽吸量应准确，抽吸量与公称液体容量的相对偏倚应在-10%~10%之间。

4.2.2 验证方法4.2.2.1 试剂

水，符合GB/T 6682的三级水的要求，温度在18°C~25°C。

4.2.2.2 仪器

500mL烧杯;考察管;滤纸;分析天平;20G(内径38mm)标准双向软连接采血针。

4.2.2.3 取样

采用一次抽样方案取样，随机抽取30支，按照标准操作进行采水，记录相关数据。

4.2.2.4 步骤(重量测定分析法)

1. a)  将 500mL 的烧杯装满水;

2. b)  将 1~30 支管进行编号且称重，这为采血管的初始重量，记为 Wi1，其中 i 为 1~30;

3. c)  将采血针的静脉穿刺针(穿透一个纯胶塞)浸入盛满水的烧杯中，另一端的管塞穿刺针刺穿真 空采血管的胶塞进行采水，保持采血管的高度与水液面的高度大致一致，采水达到平衡时拔管;

4. d)  依次将编号为 1~30 的采血管进行采水，注意烧杯内水的液面高度与采血管的液面高度保持在 同一水平线上;

5. e)  采水完毕，用滤纸吸取胶塞表面可能残留的水分;

6. f)  然后将采水后编号为 1~30 的采血管进行称重，这是真空采血管采水后的重量，记为 Wi2，其 中 i 为 1~30;

7. 
   

   g)  抽吸量的计算见式(1):
   DV=( W i 2 - W i1 )/N ................................. (1)

   
   

   式中:

   Wi1----采血管的初始重量，单位为克(g);Wi2----采血管采水后的重量,单位为克(g);i ----自然数编号，范围为1~30;

   
   

   DV----抽吸量，单位为克(g);
   N ----检测对象的总量，即 N=30。注:本标准中，以 1000mL 水的质量为 1000g。

   
   

8. h)  抽吸量与公称液体容量之间的相对偏差(relative deviation，简写为 RD)，其计算见式(2):3

NN i1 i1

WS/T 224—2018RD=(DV-NLC)/NLC×100% ................................. (2)

4.3 管体强度4.3.1 要求

采血管在水平式离心机下应能承受 3000g 的相对离心力，即测试采血管在充装水至刻度线的条件 下，用水平式离心机采用 3000g 的相对离心力，离心 10min 而不发生破裂或泄露。

4.3.2 验证方法4.3.2.1 试剂

水，符合GB/T 6682的三级水的要求，温度在18°C~25°C。

4.3.2.2 仪器

500mL烧杯;水平离心机，最大能提供5000g相对离心力。

4.3.2.3 步骤

1. a)  随机抽取 30 支采血管充装水至刻度线，并保持采血管外观干净，无液体;

2. b)  将 30 支采血管放入水平离心机中，注意离心机的平衡;

3. c)  设置离心参数，当转速稳定时的最大相对离心力为 3000g，离心时间为 10min(例:离心半径 为 17cm，转速为 4000r/min，离心 10min);

4. d)  离心机停止后，小心取出采血管;

5. e)  观察采血管外壁是否有液体渗漏。

4.4 血清分离管纤维蛋白挂壁4.4.1 要求

按照 4.4.2.2 的步骤进行测试，血清分离管离心后不应出现纤维蛋白挂壁。注:若采用分离胶促凝管进行测试时，可以增加评估分离胶的性能。

4.4.2 验证方法4.4.2.1 仪器

考察管;采血针;医用消毒用具;40 个静脉血标本;水平离心机;试管架。

4.4.2.2 步骤

1. a)  试验条件:温度为 18°C~25°C，压力为当地的环境大气压;

2. b)  将采血管进行编号，考察管依次为 1~40;

3. c)  按照标准的采血操作流程进行采血，每个人采 1 支管，采血后立刻进行摇匀(按照制造商规定 的摇匀次数)，然后竖直放置在试管架上静置;

4

1. d)  当全部 40 个人采完血后，开始记时;

2. e)  30min 后将 40 支管一次全部放入离心机中进行离心操作;

4.5 溶血情况4.5.1 要求

按照 4.4.2.2 的步骤进行测试，采血管采血后进行离心，不应出现溶血(排除临床原因)。4.5.2 验证方法

1. a)  按照 4.4.2.1、4.4.2.2a)~f)的内容进行操作;

2. b)  离心观察并记录 40 支考察管的血清或血浆质量情况。

4.6 抗凝管的凝血情况4.6.1 要求

按照 4.4.2.2 的步骤进行采血，抗凝管中充分混匀的血液标本在显微镜下观察应无凝块。4.6.2 验证方法

1. a)  按照 4.4.2.1、4.4.2.2 a)~d)的内容进行操作;

2. b)  3h 后用显微镜对 40 个标本进行观察是否有凝块。

注:4.4~4.6三项指标的评价可以结合临床性能评价一起进行测试。

4.7 无菌4.7.1 要求

真空采血管内腔应无菌，即按照 4.7.2.3 的步骤进行测试，结果判定为合格。

4.7.2 验证方法4.7.2.1 试剂

75%酒精溶液;75%酒精棉球;硫乙醇酸盐液体培养基;改良马丁培养基;0.9%无菌氯化钠溶液。

4.7.2.2 仪器

隔水式恒温培养箱;生化培养箱;生物显微镜;自动高压灭菌器;电热恒温干燥箱;酒精灯;火机; 镊子。

4.7.2.3 步骤

a) 抽样:任意抽取需考察的采血管 10 支;

b) 供试液的制备:含液体的采血管如凝血功能检测管、血沉检测管，以其管内含有的液体为供试 液;不含液体的¢16mm×100mm 采血管用 5mL0.9%无菌氯化钠溶液进行振荡溶解，作为供试液 备用;不含液体的¢13mm×100mm 的采血管用 4mL0.9%无菌氯化钠溶液进行振荡溶解，作为供

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WS/T 224—2018试液备用;不含液体的¢13mm×75mm 的采血管用 3mL0.9%无菌氯化钠溶液进行振荡溶解，作为

供试液备用;

c) 供试样品的培养:将供试液置于装有硫乙醇酸盐液体培养基、改良马丁培养基的容器中进行培 养;

1. d)  培养及观察:上述含培养基的容器按规定的温度(细菌 30°C~35°C，真菌 23°C~28°C)培养14d。培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。若出现异常时则每天上、下午各观察一次。 如在加入供试品后或在培养过程中,培养基出现浑浊，培养 14d 后，不能从外观上判断有无菌 生长，可取该培养液适量转种至同种新鲜培养基中或划线接种于斜面培养基上，细菌培养 2d,真菌培养 3d，观察接种的同种新鲜培养基是否再出现浑浊或斜面上有无菌生长;或用接种环 取培养液涂片，染色，镜检，进行判断是否有菌生长。

2. e)  阴性对照:取同一批号空白硫乙醇酸盐流体培养基、改良马丁培养基各一支作为阴性对照。阴 性对照不得有菌生长。

3. f)  阳性对照:在生物安全柜操作，接种金黄色葡萄球菌至营养肉汤培养基中，30°C~35°C培养18h~24h。用 0.9%无菌氯化钠溶液制成小于 100CFU/mL 的菌悬液。菌悬液制备后保存在 2°C~8°C，24h 内使用。接种 1mL 小于 100CFU 的金黄色葡萄球菌菌悬液于硫乙醇酸盐流体培养基中， 应生长良好。

4. g)  结果判定:当供试品管液体均显澄清，阴性对照管液体均显澄清，阳性对照管液体显浑浊时供 试品管为合格;当阴性对照管液体显澄清，阳性对照管液体显浑浊，供试品管液体显浑浊时供 试品管为不合格;当阴性对照管液体显浑浊或阳性对照管液体显澄清时，实验无效。

一般情况下，应对临床检测报告上的检测项目进行可比性验证，可优先对附录B中的检测项目进行 验证。

4.8.2 确定用于检测的检测仪器

实施结果比对时，应对用于检测临床样本的检测系统进行可比性验证。

4.8.3 比对样本4.8.3.1 样本选择

 采用来自于不同患者的临床样本作为比对样本。 

4.8.3.2 样本浓度水平

样本浓度应在方法的线性范围内，并覆盖医学决定水平。分析样本的浓度应尽可能在线性范围内均 匀分布。

4.8.4 要求

可比性验证的可接受标准应满足临床需要，同时考虑检测系统的性能状况。 不同项目分析质量要求可采用国家认可机构设置的分析质量的最低标准。 采血管不同项目比对结果的相对偏倚若符合分析质量要求，表明考察管可满足临床应用要求。

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4.8.5 验证方法4.8.5.1 采血管选择

只需使用两种不同的采血管一个批号的产品同时采血进行实验,一种是比对管，一种是考察管。

4.8.5.2 样本要求

至少分析20个不同的临床患者样本。只有在室内质控合格的情况下，实验室数据才有效。

4.8.5.3 线性回归分析4.8.5.3.1 拟合线性回归方程

以比对管的检测值为X，考察管的检测值为Y进行线性拟合。利用所有样本测定的有效数据，线性回 归方程见式(3):

式中:b----直线的斜率;a----直线的截距;X----比对管的检测值;Y----考察管的检测值。

4.8.5.3.2 计算线性回归相关系数

Y=bX+a ......................................... (3)

利用所有样本测定值进行线性回归后得相关系数(以r或R2表示)。

4.8.5.3.3 线性回归相关系数判定

如果r≥0.975(或R2≥0.95)，则认为选择的数据范围适合，数据满足要求。该分析的误差可以由数 据范围给以适当补偿，并且可以采用简单的线性回归方程来评价斜率和截距。

如果R2<0.95，那么必须通过分析另外一些样品以扩大数据范围，然后再检查全部数据系列，如仍 然R2<0.95，则应寻找待评价方法存在的缺陷，纠正后重新进行试验。

4.8.5.4 相对偏倚的计算及判定4.8.5.4.1 相对偏倚的计算

将医学决定水平(以Xc表示)代入式(3)，得到预期偏倚(以Bx表示),其计算见式(4):Bx=a+(b-1)Xc ..................................... (4)

式中:Xc----医学决定水平;Bx----预期偏倚;

Rb=Bx/Xc×100% ...................................... (5)

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Rb----相对偏倚。

4.8.5.4.2 相对偏倚的判定

不同检测项目的相对偏倚应符合国家认可机构设置的分析质量的最低标准。

4.8.6 可比性验证结果不符合要求的处理措施

对于不符合可比性验证要求的采血管，应分析原因，必要时采取相应的纠正措施，其后应对其进行 比对，确认比对结果符合分析质量要求。

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AA

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参考文献

[1] Validation and Verification of Tubes for Venous and Capillary Blood Specimen Collection; Approved Guideline. CLSI document GP34-A.

[2] Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline – Second Edition (Interim Revision). CLSI document EP09-A2-IR.

[3] Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens for Common Laboratory Tests; Approved Guideline – Fourth Edition. CLSI document GP44-A4.

[4] User Verification of Performance for Precision and Trueness; Approved Guideline – Second Edition. CLSI document EP15-A2.

[5] Tubes and Additives for Venous and Capillary Blood Specimen Collection; Approved Standard – Sixth Edition. CLSI document GP39-A6.

1. [6]  YY/T 0314—2007 一次性使用人体静脉血样采集容器

2. [7]  YY/T 0617—2007 一次性使用人体末梢血样采集容器

3. [8]  CNAS—CL38—2012 医学实验室质量和能力认可准则在临床化学检验领域的应用说明

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